俗話說“知己知彼百戰(zhàn)不殆”,在細胞培養(yǎng)過程中我們經(jīng)常會遇到各種各樣的污染,真菌污染就是常見的一種。那么,我們該如何識別細胞工廠中的真菌污染呢?發(fā)現(xiàn)真菌污染后又該如何應對呢?
真菌污染非常常見,污染細胞的對位煙曲霉、黑曲霉、毛霉菌、白念珠菌、酵母菌、孢子霉等。細胞受到真菌污染后會在培養(yǎng)液中形成白色或者淺黃色漂浮物。一般肉眼可見,較易被發(fā)現(xiàn),短期內(nèi)培養(yǎng)液多不混濁,倒置顯微鏡下可見于細胞之間縱橫交錯穿行的絲狀、管狀、及樹枝狀菌絲,并懸浮飄蕩在培養(yǎng)液中。
很多菌絲在高倍鏡可見到有鏈狀排列的菌珠;念珠菌或酵母菌形態(tài)呈卵形,散在細胞周邊和細胞之間生長。鏡下看時,要將細胞工廠用酒精棉球擦干凈,以防止與外部生長的菌絲相混淆。真菌污染后,細胞生長變慢,但最后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡。
由于真菌和細胞的生理特性類似,通常不在培養(yǎng)基中添加相應的抗生素進行預防。細胞一旦發(fā)現(xiàn)被真菌污染,應立即查找污染源,進行清理消毒。在無法控制的時候,需對整個培養(yǎng)室進行全面消毒。
總的來說,真菌生長比較慢,不如細菌容易被發(fā)現(xiàn),一旦發(fā)現(xiàn)細胞工廠中的細胞感染真菌,基本就比較嚴重了,細胞很難救活。所以平時我們要以預防為主,嚴格執(zhí)行無菌操作。
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