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96孔酶標板的使用步驟
發(fā)表日期:2021-06-23

96孔酶標板是一種配合在酶標儀上,用來做酶聯(lián)免疫實驗的器材,是酶聯(lián)免疫反應實驗中的重要載體工具。在使用時需要按照既定的步驟進行,一般情況,使用方法如下:

1、加樣品:將標本稀釋液加到包被板內(nèi),將需要檢測的血清用PBS或生理鹽水按照120的比例稀釋后取10ul加入到96孔酶標板的反應孔內(nèi)。


96孔酶標板

96孔酶標板


2、加對照:加入陰性對照3孔,陽性對照1孔,還有100ul的對照血清。

3、進行溫育:將反應板震蕩,使樣品充分的混勻,置于37℃的溫箱或者水浴反應20分鐘的時間。

4、洗板:用蒸餾水將洗滌液15ml稀釋至300ml的體積。手洗的時候應該將反應板孔內(nèi)的容物傾出,將洗滌液注滿反應孔的位置,然后放置30秒鐘后用力甩去,這樣的動作重復5次后開始拍干。機洗需要進行5次,每孔注入洗滌液200ul或者可以注滿,然后停留30秒鐘后吸盡拍干。

5、加酶標工作液:在每孔內(nèi)加入100ul的酶標工作液,放置到37℃的溫箱中,反應20分鐘后洗板5次,洗板的操作和上述步驟4是相同的。

6、這是反應的最后一步,就是顯色和終止反應:將底物50ul加到反應孔內(nèi),37℃條件下避光顯色10分鐘的時間。在每孔內(nèi)加入終止液50ul混勻用以終止反應。

96孔酶標版的使用需要在無菌的條件下進行,因此在使用前需要進行消毒,但需要注意的是有的酶標板在消毒之前需要認真的閱讀說明書,看是否可以進行高溫消毒。

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