高效搖瓶是一種常見的細胞培養(yǎng)耗材,主要用于哺乳動物細胞、昆蟲細胞等懸浮細胞的培養(yǎng),其中CHO細胞抗體制藥是其應(yīng)用領(lǐng)域的一個重要方面。
高效搖瓶
CHO細胞最早由Puck實驗室在1957年分離,通過將0.1g中國倉鼠卵巢組織酶解消化獲得。由于和人類相似的復(fù)雜翻譯后修飾,并且可以在無血清及化學(xué)限定培養(yǎng)基中快速穩(wěn)健的懸浮生長,所以CHO細胞常被用來表達具有活性的生物大分子蛋白。目前,有近70%已經(jīng)上市的治療性蛋白是由CHO細胞表達生產(chǎn)的,CHO細胞已經(jīng)成為需要復(fù)雜翻譯后修飾的治療性蛋白生產(chǎn)的主要工具。如在2021年3月上市的重組新型冠狀病毒疫苗(CHO細胞),就是由CHO細胞研發(fā)而來。其原理是將新冠病毒S蛋白受體結(jié)合區(qū)(RBD)基因重組到中國倉鼠卵巢(CHO)細胞基因內(nèi),在體外表達形成RBD二聚體,并加用氫氧化鋁佐劑以提高免疫原性。
高效搖瓶3L
在CHO細胞抗體制藥研究前期,高效搖瓶是其常用的耗材。經(jīng)過復(fù)蘇后的細胞在高效搖瓶培養(yǎng)2-3天后,細胞密度增高,營養(yǎng)物逐漸消耗完,這個時候需要對細胞進行擴增。根據(jù)細胞密度計算出擴培體積,當(dāng)達到反應(yīng)器擴培接種細胞數(shù)量要求后,停止搖瓶培養(yǎng),接種至反應(yīng)器進行培養(yǎng),培養(yǎng)完成后收獲細胞即可。
CHO細胞抗體制藥只是高效搖瓶應(yīng)用的一個方面,此外這種耗材在單抗藥物的研究、乳制品廠菌類發(fā)酵培養(yǎng)等方面發(fā)揮著重要作用。