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微流控熱泳生物傳感研究取得進展
發(fā)表日期:2021-07-27

細胞外囊泡(Extracellular Vesicles, EVs)是指從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的雙層膜結構的囊泡狀小體,直徑從40nm到1000nm不等,能將mRNAs從供體細胞轉移到受體細胞,并直接調節(jié)受體細胞的蛋白表達。細胞外囊泡中mRNA的分析為腫瘤的非侵襲性快速診斷提供了前所未有的機遇。


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細胞外囊泡的mRNA含量極低且檢測程序復雜,國家納米科學中心研究團隊開發(fā)了一種原位檢測細胞外囊泡mRNA的方法,其結合了基于F?rster共振能量轉移的脫氧核糖核酸四面體(FRET-based DNA tetrahedron,F(xiàn)DT),用于細胞外囊泡的有效內化和靶基因檢測,以及尺寸選擇性熱泳積累用于細胞外囊泡中F?rster共振能量轉移(F?rster resonance energy transfer,F(xiàn)RET)信號的擴增。這種基于脫氧核糖核酸四面體的熱泳試驗(DNA tetrahedron-based thermophoretic assay,DTTA)通過提取核糖核酸和酶擴增,檢測血清EVs中的前列腺特異性抗原(prostate specific antigen,PSA)的檢測限為14 aM。DTTA顯示在前列腺癌和前列腺良性增生的鑒別上,細胞外囊泡PSA mRNA優(yōu)于血清PSA蛋白(曲線下面積:0.93 vs 0.74;42例)。近日,研究團隊將這項研究發(fā)表在《Nano Today》雜志上,題為《Ultrasensitive detection of mRNA in extracellular vesicles using DNA tetrahedron-based thermophoretic assay》。


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這一項技術研究建立了一種超靈敏、快速、無酶的DTTA原位檢測細胞外囊泡PSA mRNA的方法,在鑒別前列腺癌和良性前列腺增生患者時,用前列腺特異性抗原基因作為替代生物標志物比血清前列腺特異性抗原蛋白具有更好的診斷準確性,其可能會極大地擴展DNA納米結構支持的液體活組織檢查的應用。



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