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96孔板出現(xiàn)“邊緣效應”的原因分析

發(fā)表日期：2021-08-10

96孔板是ELISA實驗中常用的一種細胞檢測耗材，在實驗中我們經(jīng)常會遇到“邊緣效應”，影響細胞的生長狀態(tài)，出現(xiàn)這種情況的原因是什么呢？

“邊緣效應”是指在利用96孔板進行細胞培養(yǎng)時，細胞在孔板中的位置會影響細胞的生長狀態(tài)，尤其是處在周邊及四個角的孔中細胞通常會表現(xiàn)出分布不均的現(xiàn)象，該現(xiàn)象在酶聯(lián)免疫反應中尤為常見，表現(xiàn)為96孔板外周孔顯色較中心孔深。出現(xiàn)“邊緣效應”的原因主要有兩方面：

1. 溫度效應：經(jīng)研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因。孔板的聚苯乙烯本身為不良熱導體，在實驗室的常規(guī)ELISA測定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度。
2. 蒸發(fā)效應：雖然通常細胞培養(yǎng)箱中都會放置一盤雙蒸水以維持培養(yǎng)箱中的濕度，但仍難達到多孔板中的濕度，特別是在培養(yǎng)箱經(jīng)常開關的情況更是如此。由于位置效應，邊緣孔的濕度較中間孔更低，水分揮發(fā)的現(xiàn)象就更為嚴重。這樣就容易造成四周培養(yǎng)基的體積會明顯少于中間孔，而四個角落的孔尤為嚴重。

細胞培養(yǎng)耗材