隨著生物制藥、疫苗、單克隆抗體等行業(yè)的快速發(fā)展，細(xì)胞工廠在大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中的重要性愈加凸顯。細(xì)胞培養(yǎng)是一項(xiàng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鳎瑥募?xì)胞生長環(huán)境、培養(yǎng)基的加入、收獲細(xì)胞等方面都有嚴(yán)格把控。
細(xì)胞工廠
在利用細(xì)胞工廠收獲細(xì)胞時要嚴(yán)格按照以下流程操作：
1、培養(yǎng)結(jié)束后將培養(yǎng)液倒出，使用無鈣無鎂磷酸鹽緩沖液（CMF-PBS）清洗（40-50 ml/層），若有需要重復(fù)清洗一次。
2、消化：消化液（10-40 ml/層）提前預(yù)熱。
3、收集：1000 rpm 離心5分鐘，去除消化液，收集細(xì)胞。
4、清洗：用CMF-PBS或培養(yǎng)基清洗消化過的培養(yǎng)器。
在收獲細(xì)胞時還要注意以下幾點(diǎn)：
1、確保CMF-PBS完全浸過每層培養(yǎng)面，并輕輕前后晃動細(xì)胞工廠，將殘留的培養(yǎng)液清洗干凈。
2、消化液平均分布到每層，輕輕前后左右傾斜培養(yǎng)器，確保消化液完全浸過培養(yǎng)面，輕輕拍擊培養(yǎng)器幫助細(xì)胞從表面脫離。
3、對于細(xì)胞工廠，由于不能清晰觀察中間層的細(xì)胞消化狀態(tài)，建議參照完全相同培養(yǎng)條件下的培養(yǎng)瓶或單層細(xì)胞工廠的消化狀態(tài)。亦可使用專用的多層細(xì)胞培養(yǎng)器觀察臺來觀察每層細(xì)胞的生長狀態(tài)。
細(xì)胞工廠配件
3、若清洗液或者是細(xì)胞工廠培養(yǎng)層存在大量細(xì)胞，則需要清洗多次或調(diào)整細(xì)胞消化的操作。
4、培養(yǎng)溫度的一點(diǎn)點(diǎn)偏差都可能影響到細(xì)胞的收獲率，需密切關(guān)注培養(yǎng)的溫度是所設(shè)定的溫度。
以上是細(xì)胞工廠收獲細(xì)胞的流程及注意事項(xiàng)，細(xì)胞對于環(huán)境非常敏感，做好細(xì)胞收獲工作是細(xì)胞培養(yǎng)成功與否的關(guān)鍵，需在各個環(huán)節(jié)都嚴(yán)格把控。
