我們在使用細胞工廠在培養(yǎng)Vero細胞時的注意事項有以下四點:
(1)保證細胞來源可靠,并檢測有無支原體及外源病毒污染。
(2)細胞連續(xù)傳代次數(shù)有限,需采用低代次細胞用于實驗。
(3)每次傳代使用新的細胞工廠。
而在細胞工廠培養(yǎng)培養(yǎng)過程異常處理
(1)培養(yǎng)過程中盡可能分開進行種細胞傳代。
(2)如遇細胞培養(yǎng)中培養(yǎng)液渾濁,請選擇當(dāng)天不進行細胞實驗的房間進行取樣鏡檢,鏡檢下有明顯游動的微生物則很可能是細菌污染,若不是特別明顯可取一些培養(yǎng)液在TSA平板中培養(yǎng)24-72h觀察。
(3)如遇培養(yǎng)液清澈,但細胞生長明顯受限或死亡,請選擇當(dāng)天不進行細胞實驗的房間進行取樣,進行支原體或外源病毒檢測。
(4)確定污染后務(wù)必棄去所有污染細胞、停用使用中的培養(yǎng)基,對實驗環(huán)境進行徹底消毒滅菌后再進行下批實驗。