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我們?cè)谂囵B(yǎng)細(xì)胞時(shí)最怕出現(xiàn)的情況之一就是細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)污染的情況，今天富道細(xì)胞來(lái)跟大家簡(jiǎn)單分享一下細(xì)胞工廠污染的幾種表現(xiàn)及補(bǔ)救方法。

1. 細(xì)菌污染：細(xì)胞工廠中如果出現(xiàn)細(xì)菌污染的話，具體情況表現(xiàn)為：細(xì)胞工廠在倒置顯微鏡下培養(yǎng)基內(nèi)有黑色細(xì)沙狀，且因?yàn)榧?xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞感染細(xì)菌的不同，會(huì)出現(xiàn)有不同的外形并導(dǎo)致細(xì)胞工廠里面的細(xì)胞培養(yǎng)基液體出現(xiàn)渾濁變黃的跡象，會(huì)明顯對(duì)細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)影響。

如果出現(xiàn)細(xì)菌污染情況我們需要對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞所需器皿的滅菌情況進(jìn)行仔細(xì)檢查，在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間、壓力是否足足夠，特別是用于儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等細(xì)胞培養(yǎng)耗材，如果出現(xiàn)連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲(chǔ)存液污染?？梢栽谙麓问褂门囵B(yǎng)液前檢查是否內(nèi)部存在渾濁的現(xiàn)象，并根據(jù)此現(xiàn)象添加相應(yīng)的抗生素處理。

2. 霉菌污染：細(xì)胞工廠內(nèi)如果出現(xiàn)霉菌污染的話具體表現(xiàn)為：內(nèi)部培養(yǎng)基是清亮的且在倒置顯微鏡觀察下是沒有明顯雜質(zhì)，在37度恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天，基液依舊清亮，但是內(nèi)部會(huì)有絮狀雜質(zhì)呈現(xiàn)，且鏡下觀察內(nèi)部可發(fā)現(xiàn)有細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物，有明顯的菌絲現(xiàn)象，雖然細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞仍可生長(zhǎng)，但時(shí)間長(zhǎng)之后細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)狀態(tài)變差。

那我們可以采用硫酸銅溶液來(lái)擦拭CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，后在水盤里也需要加上適度飽和量的硫酸銅。也可以在培養(yǎng)箱中托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。

3. 支原體污染：支原體污染的癥狀為黑色且形狀為多形，細(xì)胞工廠內(nèi)培養(yǎng)基會(huì)有渾濁現(xiàn)象，由于血清檢測(cè)項(xiàng)目中很少包涵支原體陰性檢測(cè)，且支原體是牛血清中最常見的微生物之一并不能采用過(guò)濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。

而出現(xiàn)這種現(xiàn)象可以可以采用獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無(wú)任何不良反應(yīng)。使用時(shí)用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。

這就是細(xì)胞工廠污染的幾種表現(xiàn)及補(bǔ)救方法，富道細(xì)胞也希望可以幫到大家。