我們在使用細(xì)胞工廠進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞時,總會有一道工序是必不可少的,那就是我們的細(xì)胞消化,而細(xì)胞消化的操作也是重中之重的,因為如果我們操作不當(dāng),會導(dǎo)致細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞狀態(tài)發(fā)生改變,會導(dǎo)致培養(yǎng)細(xì)胞時發(fā)生不必要的誤差。富道細(xì)胞就來跟大家分享一下細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時消化的方法。
我們在使用細(xì)胞工廠時使用最多的方法:酶消化法,我們在使用酶消化時,濃度基本都是控制在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細(xì)胞工廠內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞的種類、作用溫度等因素而變化,時間從幾分鐘到幾十分鐘不等。大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37恒溫的溫度下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時不能用含鈣、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。
除此方法還有一種比較罕見的酶消化法:膠原酶,此方法主要是用與原代培養(yǎng)時,從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。我們在使用細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時進(jìn)行酶消化時原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是先采用PBS潤洗細(xì)胞吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化細(xì)胞。
這就是富道細(xì)胞分享的細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時消化的方法了。希望能對大家有一定的幫助,富道細(xì)胞致力于生物耗材領(lǐng)域深耕多年,細(xì)胞耗材培養(yǎng)效果不遜于國際一線品牌。
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