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今天富道細胞來跟大家分享一下如何利用凍存管進行細胞凍存實驗，細胞凍存是指對體外培養(yǎng)的細胞通過加入液氮進行保護。以維持其各種生物特性，減少培養(yǎng)器皿、培養(yǎng)液等的消耗

細胞的凍存實驗的基本原理是利用液氮的低溫特性以及二甲亞砜（DMSO）或甘油這兩種無毒性的物質(zhì)進入細胞中，使細胞內(nèi)冰點下降，并可提高細胞膜對水的通透性，配合以緩慢冷凍的方法，可使細胞內(nèi)的水分逐步地滲透出胞外。那我們知道其原理之后就跟大家分享一下其具體步驟吧：

首先我們依照傳代的方法用 0.25% 胰蛋白酶液對處于對數(shù)生長期的單層細胞進行消化。收集消化細胞于離心管中，800～1000 r/min 離心 5 min。然后棄上清液，加入適量凍存液，用吸管吹打細胞制懸，調(diào)整細胞密度為 5 x 106～1 x 107 個/ml。后續(xù)將每個凍存管分裝細胞懸液 1 ml，旋緊凍存管的蓋，并用蠟膜封嚴。在凍存管上標明細胞的名稱、凍存時間、凍存人名等。然后將將凍存管置于如下條件下逐步加以凍存：4 ℃，1 h→- 20 ℃，2 h→- 85 ℃，2 h→液氮。

以上步驟就是富道細胞來跟大家分享一下如何細胞的利用凍存管進行細胞凍存實驗的方法了，希望對大家有所幫助。