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我們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)過程中，為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或原代細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。今天就跟大家分享一下凍存管凍存原代細(xì)胞技術(shù)。

首先我們要知道我們?cè)诩?xì)胞凍存的時(shí)候，是有一些先決條件的，比如我們?cè)谟^察原代細(xì)胞時(shí)要選用生長數(shù)量好且多的細(xì)胞，而且在使用凍存管進(jìn)行凍存之前還需在前一天換液。而且我們?cè)谑褂脙龃婀苓M(jìn)行凍存貼壁細(xì)胞的時(shí)候需要用胰酶將細(xì)胞消化下來，后續(xù)將懸液置于離心管之中進(jìn)行離心之后，在將清液棄用，后續(xù)沉淀的時(shí)候可以加培養(yǎng)液（一般為二甲亞砜或甘油的培養(yǎng)基）。

后續(xù)需要進(jìn)行懸液分管，在分管的時(shí)候切記封口一定要嚴(yán)，且不能超過凍存管的容量，否則會(huì)在復(fù)蘇和凍存的時(shí)候會(huì)發(fā)現(xiàn)管壁爆裂。在密封好凍存管之后需要進(jìn)行詳細(xì)記錄，如使用sbs凍存管也需要及時(shí)進(jìn)行錄入詳細(xì)信息，或者用記號(hào)筆標(biāo)明細(xì)胞種類和凍存日期。

需要注意的是使用凍存管凍存的溫度一般用液氮的溫度－196℃，但是是以一定的冷卻速度凍存，最終保存于液氮中，可以按照以下順序進(jìn)行降溫：室溫→4℃（20分鐘〕→冰箱冷凍室（30分鐘）→超低溫冰箱（－80℃過夜）→液氮，在這種極低的溫度下，細(xì)胞保存的時(shí)間幾乎是無限的。這就是給大家分享的凍存管凍存原代細(xì)胞技術(shù)了，希望對(duì)大家有所幫助。