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合適的PH值是細胞生長的必要條件，在利用細胞搖瓶培養(yǎng)細胞時，我們有時候會遇到培養(yǎng)液PH值變化太快的情況，這樣對細胞的生長非常不利。那么，這是什么原因造成的，我們又該如何應(yīng)對呢？

1、二氧化碳張力不對：按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2 濃度，2.0 g/L到3.7 g/L濃度NaHCO3對應(yīng)CO2濃度為5％到10％?；蛘吒挠貌灰蕾嘋O2培養(yǎng)液。

2、瓶蓋擰得太緊：松開瓶蓋1/4圈。

3、NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖力不足：加HEPES緩沖液至10到25 mm 終濃度

4、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確：在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液，在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液

5、細菌、酵母或真菌污染：如果細胞搖瓶中的培養(yǎng)液受到污染，也會導(dǎo)致PH值的變化，這個時候就需要視污染情況而定，選擇丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。

大多數(shù)細胞適于在pH7.2~7.4條件下生長，低于pH6.8或高于pH7.6對細胞有害，甚至退變或死亡。各種細胞對pH值的要求不盡相同，一般原代培養(yǎng)細胞對pH值的堿性的耐受比對酸性的耐受差，偏酸的環(huán)境比偏堿的環(huán)境對細胞生長有利。如果細胞搖瓶培養(yǎng)液中的PH值變化太快，我們需要分析具體原因，然后再進行下一步的操作。